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2021-08-12
RNA免疫共沉淀(RNAimmunoprecipitation,RIP)是一種基于抗體的技術(shù),用于定位體內(nèi)的RNA-蛋白質(zhì)相互作用。將所關(guān)注的RNA結(jié)合蛋白(RBP)與其結(jié)合的RNA一起進行免疫沉淀,鑒定結(jié)合轉(zhuǎn)錄RNA(mRNA、非編碼RNA或病毒RNA),可以通過實時PCR、微陣列或測序檢測。表觀遺傳學和RNA生物學領域?qū)Σ煌琑NA作用和功能的關(guān)注大大增加。據(jù)觀察,RNA的功能遠不止轉(zhuǎn)錄和后續(xù)的翻譯。例如,RNA-蛋白質(zhì)相互作用能夠調(diào)控mRNA和非編碼RNA的功能。對RNA...2021-08-11
細胞凋亡(apoptosis)指為維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定,由基因控制的細胞自主的有序的死亡。細胞凋亡與細胞壞死不同,細胞凋亡不是一件被動的過程,而是主動過程,它涉及一系列基因的激活、表達以及調(diào)控等的作用,它并不是病理條件下,自體損傷的一種現(xiàn)象,而是為更好地適應生存環(huán)境而主動爭取的一種死亡過程。下面介紹幾種常用的檢測細胞凋亡的方法。一、TUNEL法脫氧核糖核苷酸衍生物digoxin在TdT酶的作用下,可以摻入到凋亡細胞雙鏈或單鏈DNA的3-OH末端,與dATP形成異多聚體,并可與連接了...2021-08-02
1、樣本準備過程中防止蛋白質(zhì)降解和保留翻譯后修飾樣本準備過程中,細胞會釋放蛋白酶和/或去磷酸化酶,為了減少這些酶的活性,處理樣本的過程應在冰上進行,并預先冷卻所有緩沖液,并且建議用含蛋白酶和磷酸酶抑制劑的裂解緩沖液。2、磷酸化特異性抗體的選擇選擇磷酸化特異性抗體時,選擇所要檢測位點的磷酸化抗體至關(guān)重要。磷酸化都會使蛋白質(zhì)的分子量增加80Da,檢查抗體是否檢測到磷酸化靶蛋白的分子量正確的條帶也很重要。3、誘導磷酸化課題設計可能需要在收獲前刺激細胞,以確保蛋白質(zhì)被磷酸化。例如,在...2021-08-02
蛋白轉(zhuǎn)印的方法蛋白轉(zhuǎn)印可選擇傳統(tǒng)濕轉(zhuǎn)、半干轉(zhuǎn)或快速半干轉(zhuǎn)方法。濕轉(zhuǎn)系統(tǒng):適用于大多數(shù)各種分子量的常規(guī)蛋白轉(zhuǎn)印。轉(zhuǎn)印過程中凝膠和膜被浸入充滿轉(zhuǎn)印緩沖液的槽中。半干轉(zhuǎn)系統(tǒng):凝膠和膜被夾在預先潤濕緩沖液的濾紙之間,濾紙與平板電極直接接觸。半干轉(zhuǎn)系統(tǒng)的安裝使用比濕轉(zhuǎn)簡單。快速轉(zhuǎn)印系統(tǒng):快速轉(zhuǎn)印系統(tǒng)是最近發(fā)展出來的技術(shù),使用專用設備、專用濾紙及專用緩沖液來快速有效地轉(zhuǎn)印蛋白。通常濾紙和濕潤的膜預先放在一次性包裝中,簡化了轉(zhuǎn)印“三明治”的組裝。轉(zhuǎn)印緩沖液轉(zhuǎn)印緩沖液包含強導電性化學緩沖試劑...2021-07-30
中山大學藥學院于7月27日發(fā)布通報,該院2021年7月27日發(fā)生一起實驗安全事故,實驗=室在清理通風柜時發(fā)現(xiàn)之前畢業(yè)生遺留在燒瓶內(nèi)的未知白色固體,一博士研究生用水沖洗時發(fā)生炸裂,炸裂產(chǎn)生的玻璃碎片刺破該生手臂動脈血管,送醫(yī)救治傷情得到控制,無生命危險。與實驗室負責老師溝通分析,導致炸裂的未知白色固體中可能含有氫化鈉或氫化鈣,遇水發(fā)生劇烈反應而炸裂。實驗室的瓶瓶罐罐清洗是科研工作者最日常的工作,但是,如果你并不確定瓶內(nèi)裝的是什么東西,千萬不要隨意就拿去清洗!有些化學品遇水會發(fā)生...2021-07-29
研究人員發(fā)現(xiàn),盡管大腦通過中腦產(chǎn)生5-羥色胺的神經(jīng)元來調(diào)節(jié)快感和饑餓感的進食,但每種進食方式都是由自己獨立的電路連接的,不影響其他類型的進食方式。美國疾病控制與預防中心(CentersforDiseaseControlandPrevention)的數(shù)據(jù)顯示,無論是由饑餓還是愉悅引起的暴飲暴食,通常都會導致肥胖。美國約42%的成年人都患有肥胖癥。一個由貝勒醫(yī)學院(BaylorCollegeofMedicine)的研究人員領導的國際研究小組在動物模型上研究了大腦是如何調(diào)節(jié)饑餓或其...